No.325 研究課題 / Project
多摩川流域におけるダニの生息分布調査およびダニ媒介性人獣共通感染症調査Survey of Tick Habitat Distribution in the Tama River Basin and Survey of Tick-borne Zoonoses学術研究 Academic Research |
No.325 |
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代表研究者 Principal Investigator |
三浦 こずえ Kozue Miura |
所属(採択当時) Affiliation |
東京大学大学院農学生命科学研究科 獣医学専攻獣医公衆衛生学教室 准教授 Laboratory of Veterinary Public Health, Department of Veterinary Medical Sciences,Graduate of School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo Associate Professor |
研究内容要約 Research Summary |
2015年10月と2016年3月から10月の間、多摩川沿いの遊歩道にて、ダニの採集を行った。その結果、総数551匹(オオトゲチマダニ21匹、キチマダニ68匹、フタトゲチマダニ102匹、ヒゲナガチマダニ1匹、ヤマトマダニ2匹、チマダニ幼虫357匹)を採集し、成虫と若虫は1匹ずつ、幼虫は1-5匹を1検体としてまとめ計266検体とした。これらのダニをビーズにて粉砕し、RNA抽出後、RT-PCR法にて各種病原体の遺伝子検出を行った。その結果、重症熱性血小板減少症ウイルス(SFTSV)、フラビウイルス遺伝子は全て陰性であった。リケッチア17-kD遺伝子は2/256, gltA遺伝子は6/266で陽性となり、gltA遺伝子の検出感度が高かった。さらに、フレボウイルスL分節遺伝子は1/266で陽性となった。PCR法で増幅された17kD、 gltA遺伝子とフレボウイルスL分節遺伝子に加えてS分節遺伝子の解析も行った。リケッチアgltA遺伝子は6検体とも同一配列で、R. japonicaと98.8%一致、Candidatus R. Vini およびR spp. Hf332とは100%一致した。フレボウイルスは解析の結果、日本ではYongjia Tick VirusやLesvos Virusと同じクラスターに入る日本では初報告となる株であった。 In October 2015 and from March to October 2016, we collected tick samples on footpaths along the Tama River. As a result, we collected a total of 551 samples (21 Haemaphysalis megaspinosa, 68 H. flava, 102 H. longicornis, 1 H. inermis Birula, 2 Ixodes ovatus, and 357 Haemaphysalis larvae). From these, we prepared 266 specimens, with each specimen consisting of one imago, one nymph, and between one and five larvae. After grinding these ticks with beads and extracting their RNA, we detected the genes of various pathogens by means of the RT-PCR technique. The results were all negative for severe fever with thrombocytopenia syndrome virus (SFTSV) and Flavivirus genes. There were positive results for Rickettsia 17-kD gene in 2/266 and gltA gene in 6/266, with a high detection sensitivity for the gltA gene. In addition, there was a positive result for the Flavivirus L-segment gene in 1/266. In addition to 17-kD amplified using the PCR technique, the gltA gene and the Flavivirus L-segment gene, we analyzed the S-segment gene. The sequence of the Rickettsia gltA gene was identical in all six specimens, with a 98.8% match to R. japonica and a 100% match to Candidatus R. Vini and R. spp. Hf332. Analysis of the Flavivirus revealed it to be the first to be reported in Japan of a strain in the same cluster as Yongjia tick virus and Lesvos virus. |
共同研究者 Collaborators |
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