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No.299 研究課題 / Project

多摩川流域における親水活動を介した健康関連微生物の水系感染リスクの評価Evaluation of risk of pathogen infection via contaminated water during recreational activities in the Tamagawa River basin

学術研究
Academic Research
No.299
代表研究者
Principal Investigator
原本 英司
Eiji Haramoto
所属(採択当時)
Affiliation
山梨大学 大学院医学工学総合研究部 附属国際流域環境研究センター 助教
Interdisciplinary Graduate School of Medicine and Engineering, University of Yamanashi
研究内容要約
Research Summary
本研究では,多摩川の河川水中における水系感染性の病原微生物(ウイルスおよび原虫)の存在実態を解明することを目的とした。陰電荷膜破砕型濃縮法を用いて河川水2Lを濃縮し,リアルタイムPCRによってウイルス,蛍光顕微鏡観察によって原虫を定量した。14ヶ月間の調査期間中に採取した42試料のうち,ヒトアデノウイルスは22試料(陽性率52%),ノロウイルスGIは28試料(67%),ノロウイルスGIIは7試料(17%),アイチウイルスは23試料(55%),クリプトスポリジウムは9試料(21%)およびジアルジアは25試料(60%)から検出された。病原微生物の陽性率と濃度は,上流域(地点1)に比べ,中流域(地点2)と下流域(地点3)において高い値を示し,下水処理水の影響を強く受けていることが示唆された。大腸菌群などの指標微生物についても同様の傾向が見られた。また,遺伝子解析の結果,河川水から検出されたジアルジアの遺伝子型は人獣共通感染型であり,ヒトアデノウイルスの遺伝子型は急性胃腸炎の病因である40型と41型であった。さらに,細菌の1種であるバクテロイデスを検出できたことから,本研究で使用した陰電荷膜破砕型濃縮法が細菌に対しても有効であることが示された。最後に,水系感染リスクの評価につながる知見として,感染力を有する病原微生物の濃度を推定し,地点2における濃度が年間を通して最も高い値で推移することを明らかにした。

This study aimed to determine the prevalence of waterborne pathogens (i.e., viruses and protozoa) in the Tamagawa River water. River water samples (2 l each) were subjected to pathogen concentration using the electronegative-membrane vortex method, followed by quantitative detection of viruses and protozoa using real-time PCR and fluorescent microscopy, respectively. During a 14-month survey, human adenovirus, noroviruses GI and GII, Aichivirus, Cryptosporidium oocysts, and Giardia cysts were successfully detected in 22 (52%), 28 (67%), 7 (17%), 23 (55%), 9 (21%), and 25 (60%) of the 42 river water samples, respectively. Compared to the upstream site (Site 1), the prevalence of pathogens was quite high in the midstream and downstream sites (Sites 2 and 3), implying a significant effect of treated sewage on pathogen contamination of the river. Indicator microorganisms such as total coliforms were also detected in high concentrations at Sites 2 and 3. Based on the sequence analysis, a zoonotic genotype of Giardia cysts and waterborne human adenovirus genotypes 40 and 41 were identified in these samples. The electronegative membrane-vortex method successfully concentrated Bacteroidales genomes, suggesting a potential future application of this method to bacteria detection. Among the 3 sites studied, the concentration of probably-infectious pathogens was the highest at Site 2.
共同研究者
Collaborators
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